密西西比河水量最大的支流是俄亥俄河。它发源于美国东部阿巴拉契亚山脉西坡，干流由阿勒格尼河与莫农加希拉河在匹茨堡附近汇合而成，一路弯曲西流，沿途纳入田纳西河、沃巴什河、肯塔基河等支流，在伊利诺斯州的开罗市注入密西西比河， 途经俄亥俄州、印第安纳州、伊利诺伊州、西弗吉尼亚州和肯塔基州，全长2100米。俄亥俄河上游水流较急，河谷一般不到800米宽；下游流经中央平原，水流平缓，河道弯曲，河谷有800~2000米宽，大多数河段可通航。早在17世纪，俄亥俄河沿岸就出现了不少欧洲白人建的贸易站，18世纪随着采矿、冶金、农产品加工和商贸的兴起，铁路的通达，一批城市出现。目前俄亥俄河两岸有匹茨堡、帕克斯堡、辛辛那提、路易斯维尔、欧文斯伯勒、埃文斯维尔、等十几个较大的城市。
俄亥俄河沿岸最著名的城市就是有美国“钢都”之称的匹茨堡，它位于俄亥俄河上游，阿勒格尼河、莫农加希拉河与俄亥俄河交汇处，宾夕法尼亚州西南部；这里在17世纪就是欧洲白人建的一个皮毛站，18世纪中叶法国人在此建立殖民据点，1758年英国人夺得该地以当时英国首相威廉皮特命名“匹茨堡”，1851年铁路通达，成为重要的水陆交通枢纽。19世纪80年代，钢铁大王安德鲁卡内基在此建立卡内基钢铁公司，因附近有丰富的铁矿石、石灰石和烟煤，加之便利的水陆运输，钢铁工业兴起；二战后匹茨堡钢铁工业获极大发展，鼎盛时期钢铁产量曾占美国一半，获得美国“钢都”的美名；20世纪80年代后匹茨堡钢铁业衰退，至90年代所有钢厂全部关闭。21世纪以来，匹茨堡在著名高校卡内基梅隆大学、匹茨堡大学的带动下，一大批从事计算机软件、生物制药、机器人、人工智能等研究开发和生产的高科技企业发展起来，经济成功转向生物技术、医疗、计算机技术、机器人制造及金融、教育和旅游，成为美国经济成功转型的典范。创建于1900年的卡内基梅隆大学是美国顶尖的私立大学，设在匹茨堡，其计算机科学常年与麻省理工学院、加州大学伯克利分校、斯坦福大学并列全美第一。匹茨堡大学是始建于1787年历史悠久的公立大学，他的医学院、生物技术和信息科学在美国大学中名列前茅；匹茨堡大学医学中心（医院）是美国最成功的区域性医院之一，以神经外科、器官移植、基因治疗最著名。匹茨堡是仅次于费城的宾夕法尼亚州第2大城市，人口30多万，匹茨堡大都会区有230多万人口。匹茨堡是许多《财富》世界500强企业如美国钢铁公司（美国最大的钢铁制造企业）、PNC金融服务集团（美国第五大银行）、亨氏公司（世界食品业巨头）、西屋电气公司（世界最大电气设备制造商之一）、美国铝业公司（世界最大的铝材生产商之一）、PPG工业集团（世界最大油漆涂料制造商之一）等的总部所在地。匹茨堡地标建筑是高263米、64层的美国钢铁公司大厦。匹茨堡文化体育十分繁荣，有美国最大的自然历史博物馆之一的卡内基自然历史博物馆，有美国最大的个人作品美术馆——安迪沃霍尔美术馆，有美国最著名交响乐团之一的匹茨堡交响乐团，有曾6次获得美国国家橄榄球联盟“超级碗”冠军的球队——匹茨堡钢人队，有三次获得北美职业冰球联赛“斯坦利杯”冠军的球队——匹茨堡企鹅队。2009年匹茨堡成功举办了G20峰会（即20国集团领导人峰会）。匹茨堡因钢铁、体育赛会和机器人研发著名而被昵称为“钢铁之城”、“冠军之城”、“机器人之城”。
俄亥俄河沿岸最大城市是肯塔基州的路易斯维尔市，人口70万多万。该市位于俄亥俄河南岸，肯塔基州中北部，由1778年法国人乔治克拉克以当时法国国王路易十六命名。早期因利用俄亥俄河发展内河水运，成为美国中部重要的商贸中心之一；现在的经济支柱是制造业、商业、医疗保健和教育。建于1798年的路易斯维尔大学是一所公立综合性大学，其商科、工程、教育、生物化学、临床心理学、听力学等十分著名。路易斯维尔是世界第二大连锁快餐企业——肯德基（肯塔基州炸鸡的简称）总部所在地，1952年美国人哈兰山德士在路易斯维尔创立，现在全世界各地有18000家餐厅（门店），在中国各城市有5000多家餐厅（门店）。
俄亥俄河沿岸还有一个美国著名的工商业城市——辛辛那提（属俄亥俄州），地处俄亥俄河北岸，俄亥俄州西南端，人口30多万。辛辛那提于1819年正式设市，成为美国中部主要的水陆交通枢纽，19世纪后期因通往美国南方的大铁路通车，迅速兴起为美国重要的铁路枢纽；20世纪以来，机床、汽车零部件、飞机部件、农业机械、化学制药、电子、服装、日用化工等工业发展起来，有美国“机床之府”的美称，《财富》世界500强企业宝洁公司、梅西百货、克罗格公司的总部均设在辛辛那提。始创于1837年的宝洁公司是世界日用消费品制造巨头，其产品包括洗发护发用品、化妆品、妇女卫生用品、婴儿护理产品、个人清洁用品等；始创于1858年的梅西百货是美国高档百货连锁商场，主要经营服装、鞋帽和家庭装饰品，在全美国有800多家店面；克罗格公司是美国主营食品与药品的商业零售企业，现在美国各地有2000多家连锁超级商场，是美国仅次于沃尔玛、家居仓储的第三大商业零售公司。